Microsgopeg fflworoleuedd: egwyddorion y dull

Amsugno ac ail-allyrru hylifau anorganig ac organig bellach golau yn ganlyniad phosphorescence neu fflworoleuedd. Y gwahaniaeth rhwng y ffenomena yw hyd y cyfnod rhwng amsugno a allyriadau fflwcs golau. Pan fydd y fflworoleuedd y prosesau hyn yn digwydd bron yr un pryd, tra bod phosphorescence - gyda rhywfaint o oedi.

gwybodaeth hanesyddol

Yn 1852,, a ddisgrifir gwyddonydd Prydeinig Stokes fflworoleuedd gyntaf. Cyflwynodd tymor newydd o ganlyniad i'r arbrofion gyda fflwrospar, sy'n allyrru golau coch dan olau uwchfioled. Nododd Stokes ffenomen ddiddorol. Fe'i ceir bod tonfedd y pelydriad fflwroleuol bob amser yn fwy na'r llif y golau excitation.

Cadarnhau'r ddamcaniaeth yn y 19eg ganrif bu llawer o arbrofion. Maent yn dangos bod amrywiaeth o samplau fflwroleuo dan ddylanwad golau uwchfioled. Ymhlith y deunyddiau, ymhlith pethau eraill, wedi bod crisialau, resinau, mwynau, cloroffyl, cyffuriau crai, cyfansoddion anorganig, fitaminau, olewau. Dechreuodd y defnydd uniongyrchol o lliwiau ar gyfer profion biolegol yn unig yn 1930

microsgopeg fflwroleuedd: Disgrifiad

Mae rhai o'r deunyddiau a ddefnyddir yn ystod hanner cyntaf yr 20fed ganrif astudiaethau arddangos phenodoldeb uchel. стал важнейшим инструментом и в биомедицинских, и в биологических исследованиях. Diolch i'r perfformiad, na ellid ei gyflawni trwy ddulliau cyferbyniol, y dull o microsgopeg fflworoleuedd wedi dod yn offeryn hanfodol mewn ymchwil biofeddygol a biolegol. Yn yr un modd canlyniadau pwysig cafwyd, ac ar gyfer deunyddiau.

? Pa fanteision sydd gan y dull o microsgopeg fflworoleuedd? Gan ddefnyddio deunyddiau newydd wedi dod yn bosibl ac y dewis o gydrannau submicroscopic cell penodol iawn. Gall microsgopeg fflworoleuedd ganfod moleciwlau unigol. Mae amrywiaeth o liwiau yn bosibl adnabod eitemau lluosog ar unwaith. Er gwaethaf y dosbarthiad cyfyngedig o'r terfyn diffreithiant yr offer, a fydd, yn ei dro, yn dibynnu ar yr eiddo penodol y sampl, adnabod moleciwlau dan y lefel hon hefyd yn eithaf bosibl. samplau Amrywiol ôl autofluorescence arddangosyn arbelydru. Mae'r ffenomen yn cael ei defnyddio'n eang mewn petroleg, botaneg, y diwydiant lled-ddargludyddion.

nodweddion

Astudio meinweoedd anifeiliaid neu bathogenau yn aml yn gymhleth neu'n rhy wan neu'n gryf iawn autofluorescence amhenodol. Fodd bynnag, mae'r gwerth mewn astudiaethau yn caffael cyflwyniad i'r cydrannau deunydd cyffroi ar donfedd benodol ac yn allyrru dwysedd llif olau angenrheidiol. Fluorochromes gweithredu fel lliwiau sy'n gallu annibynnol ynghlwm wrth strwythurau (gweladwy neu anweledig). Felly mae ganddynt detholedd uchel at y targed, ac mae'r cynnyrch cwantwm.

стала широко применяться с появлением естественных и синтетических красителей. microsgopeg fflworoleuedd wedi cael ei defnyddio yn eang ers dyfodiad lliwiau naturiol a synthetig. Maent yn meddu ar rai proffiliau dwysedd y gollyngiad a excitation ac wedi'i dargedu at dargedau biolegol penodol.

Adnabod moleciwlau unigol

Yn aml, mewn amodau delfrydol, gallwch gofrestru elfen glow ar wahân. Ar gyfer hyn, ymhlith pethau eraill, mae angen i ddarparu swn digon isel y synhwyrydd a'r cefndir optegol. moleciwl Fluorescein i fethiant oherwydd photobleaching gall allyrru hyd at 300 mil. Ffotonau. Ar 20% effeithlonrwydd casglu o'r broses ac yn gallu eu cofrestru mewn swm o tua 60 mil.

, основанная на лавинных фотодиодах или электронном умножении, позволяла исследователям наблюдать поведение отдельных молекул на протяжении секунд, а в ряде случаев и минут. microsgopeg fflworoleuedd seiliedig ar photodiodes llu neu luosi electronig, yn caniatáu i'r ymchwilwyr i arsylwi ymddygiad moleciwlau unigol drwy'r ail, ac mewn rhai achosion, hyd yn oed munud.

cymhlethdod

Un mater allweddol o blaid y atal o gefndir sŵn optegol. Oherwydd y ffaith bod llawer o'r deunyddiau a ddefnyddir yn y dyluniad o hidlyddion a lensys arddangos rhai autofluorescence, ymdrechion o wyddonwyr yn y camau cynnar eu gogwyddo at gynhyrchu cydrannau gael fflworoleuedd isel. Fodd bynnag, mae arbrofion wedi hynny wedi arwain at gasgliadau newydd. , основанная на полном внутреннем отражении, позволяет достичь низкого фона и высокоинтенсивного возбуждающего светового потока. Yn arbennig, gwelwyd bod microsgopeg fflworoleuedd, yn seiliedig ar adlewyrchiad mewnol, mae'n caniatáu i gyflawni cefndir isel a golau excitation dwysedd uchel.

mecanwaith

, основанной на полном внутреннем отражении, заключаются в использовании быстрозатухающей или нераспространяющейся волны. Mae egwyddorion microsgopeg fflworoleuedd, yn seiliedig ar adlewyrchiad mewnol yw defnyddio tonnau ddiflanedig neu ddiflanedig. Mae'n digwydd ar y ffin rhwng cyfryngau gyda gwahanol mynegeion blygiannol. Yn yr achos hwn, y golau yn pasio trwy'r prism. Mae ganddo paramedr mynegai blygiannol uchel.

Prism wrth ymyl y hydoddiant dyfrllyd neu wydr gyda paramedr isel. Os pelydryn o olau ei gyfeirio at ei ar ongl sy'n fwy beirniadol, y trawst yn cael ei adlewyrchu yn llwyr oddi wrth y rhyngwyneb. Mae hyn yn ffenomen, yn ei dro, yn achosi tonnau nonpropagating. Mewn geiriau eraill, mae'r maes electromagnetig a gynhyrchir sy'n treiddio i mewn i ganolig gyda mynegai blygiannol is paramedr at bellter llai na 200 nanometr.

Mae'r don ddiflanedig dwysedd y golau yn ddigon i gyffroi fluorophores. Fodd bynnag, oherwydd ei ddyfnder eithriadol o fach, bydd ei gyfaint yn fach iawn. Y canlyniad yw cefndir lefel isel.

addasu

microsgopeg fflworoleuedd yn seiliedig ar adlewyrchiad mewnol, gellir eu gweithredu gyda epi-olau. Mae hyn yn gofyn lensys gyda agorfa rhifiadol uchel (o leiaf 1.4, ond mae'n ddymunol ei fod yn cyrraedd 1.45-1.6), a goleuedig offer cae rhannol. Mae'r olaf yn cael ei gyflawni gyda maint bychan ar hap. Am mwy o unffurfiaeth gan ddefnyddio cylch tenau, sy'n cael ei rwystro gan gyfran o'r nant. Ar gyfer y ongl gritigol, ac ar ôl hynny mae cyfanswm adlewyrchiad, mae angen lefel uchel o plygiant cyfrwng drochi yn y lens a'r clawr gwydr y microsgop.